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共謀論再論延伸探討
華彩咨詢白萬綱 2013-11-20 10:48
共謀論再論延伸探討
第一,、共謀的有趣粒子,,軸心國 不管是二次世界大戰(zhàn)時期的軸心國,還是當今被美國所謂的邪惡軸心國,,有很多人關注,,它到底是怎么形成的,其實并沒有人有意地把他們組織在一起,,他們也沒有歃血為盟,建立一個軸心國同盟,,是他們的共同的利益,,他們在運動過程當中發(fā)現,彼此之間可以形成一個更好的一種合圍關系,,這樣的一個現實,,導致他們互相探索,,互相尋找共謀點。比如說目前中國和俄羅斯,,美國壓迫得再厲害一點,,中國和俄羅斯的共謀就會形成,但是美國各個擊破,,促使俄羅斯加入世貿協定,,促使北約對俄羅斯做出某種承諾的讓步,又使得這種共謀在臨界點上難以形成,。 第二,、共謀的普遍范例 植物入侵或生物入侵,植物入侵是最典范的一種共謀,,入侵的植物會與新土壤當中的各種微生物之間,,達成一種互相利用,在原土壤當中的各種生物之間,,經過漫長的運動以后,,會形成一定程度上的相互制衡,任何物種都會有它的天敵,,但是新物種的到來,,把這種天敵感打破了,所以新物種和當地的利他的細菌群之間,,形成一種合謀,,迅速造就了這種生物入侵的廣泛的泛濫效應,大規(guī)模的典范,,就是美國的國家戰(zhàn)略與國家管控,。大張旗鼓地利用陰謀、陽謀兩手硬,,兩手一起抓的手段,,把美國的各種同謀公諸于眾,使得各個國家選邊站,,而選邊站本身又促使美國的國家戰(zhàn)略的余地和要素變多,,這種余地和要素變多,又促使美國國家戰(zhàn)略升級,,由此帶出來一個龐大的美國的共生利益體系,。 如果沒有陽謀和陰謀的并舉,沒有嚷出去,,讓世界各國選邊站,,沒有有意識地塑造美國國家聯盟同盟國的利益,沒有有意識地把國際分成多個細膩的層次,區(qū)別于對待,,從而使得外圍的國家不停地打破頭往里擠,,內圍的國家拼盡辦法想留在內圍,是沒法形成當今這么一個龐大而有效的共謀的,。 第三,、共謀對世界的改變 共謀肇始自一種有效的,在民間層面上的自發(fā)的,,自然的共謀,,后來有人發(fā)現,這種自然的共謀,,各種利益相同的人,,各種有同樣追求的人,可以自然耦合在一起,,但是可以通過一定的,,把他們的各種利益引申出一段虛線,在虛線的結合點,,呼喚他們,,讓他們都往前,分別走一步,、兩步,、三步、四步,,走到一個更大的合謀區(qū),,找到一個更高的共振和更大的集體利益的話,事實上大家是做得到的,,這就誕生了謀略學,。 從最古老的陰陽家,合縱聯合家就開始,,用謀略來改變世界,,東方是謀略大國,中國的謀略學是世界上最豐富的,,理論上中國應該對各種陰謀,、陽謀、合謀,、計謀,、鬼謀,應該做出重大的推動,,但是很遺憾,,中國的謀略學,止于古代,當今已經摒棄了對謀略學的研究,,即便是軍方,對謀略學的重視程度,,顯然也非常低,。 但是共謀在共產主義的誕生上,在推進各個國家的國家制度的變化上,,推進各個國家產生暴力革命上面,,有巨大的指導意義,促使各種有相似利益,,接近利益的人,,在這個大的泛理論下面,找著一種寬共謀區(qū),,高共謀區(qū),,從而促使共產主義在國際上出現。沒有共謀,,是不能想象的,。包括流行服裝和音樂,是若干商業(yè)巨頭主動被管理過,、引導過的一種共謀,。在《第五項修煉》當中,彼得圣吉也指出,,一個優(yōu)秀的組織,、國家和企業(yè),可以通過某種管理和設計,,把個人夢想推高到集體夢想的高度,,其實這本質上就是一種共謀。 第四,、國家層面的共謀管理 事實上,,蘇聯的計委,日本的產經聯,,美國的智囊,,都在推進國家層面的共謀管理,以種種核心概念,、核心制度,、核心謀略、核心設計和核心框架,、核心體系的產生,,把若干分散利益,兜結在一起,集結在一起,,促使他們高層面運轉,。而企業(yè)層面的共謀更是典范叢生,大名鼎鼎的英特爾和微軟的合在一起的聯盟,,加Wintel聯盟,,就是一個典型的企業(yè)層面的共謀。大連萬達所形成的企業(yè)與若干用戶之間的所謂的訂單地產,,是一種最廣泛的共謀,,也是最革命性的共謀。解決了所有的利益相關者之間,,高位共謀的一個典范設計問題,。 第六、禪學就是一種共謀 因為漢人的浪漫和不肯吃苦,,漢人堅持不了長時間的很冷清的,,很艱苦的對某一種經學的苦修,所以在中原地區(qū),,立即產生出一種對佛教的新版本的改造,,就是所謂的禪學,禪學指出,,人不用苦修,,只要能夠悟了,就可以迅速地繞過之前的種種苦修階段,,直接達到間性成佛的高度,,這事實上是一種佛教在中原推廣的時候,若干佛學大師,,根據漢人的生活習性和文化秉性,,所設計出來的一種新的佛學3.0版本,可以迅速地使之通佛學,,修佛學,,領悟佛學的精髓的一種概念學說。 反過來說,,你到底有沒有領悟,,有沒有領悟禪的高度,本身又是模糊的,,不能討論的,,沒有標準的。所以這樣一種神秘的東西,,非常契合中原漢人,,尤其是高級知識分子對佛學的葉公好龍,,所以一經推出,立即得到廣泛的歡迎,,從而形成一個世界范圍里的潮流,。到目前為止,若干神秘主義仍然打著禪學的幌子,,在那里繼續(xù)推進,。甚至在世界上,有若干禪學大師,,本質上實際上是在研究玄學,他和佛學已經沒有什么嚴格的關系了,,但是呢,,仍然形成了佛學的一個中原版本。 第七,、藏密佛教 事實上又是對藏族地區(qū)的一個創(chuàng)造,,也是一個新的3.0版本,根據藏人的吃苦耐勞精神,,強烈的信仰感和救贖精神,,創(chuàng)造出一種當世,通過苦苦修行,,強烈的投入,,可以直接肉身成佛的一種學說,促使藏人感覺到,,這一世,,在我活著的時候就可以直接通過苦修藏密成佛,肉身成佛,,直接救我于苦難當中,,把這種轉世、未來等等,,這樣一種終因等等學說,,轉化成了一種可見的,很現實的一種追求,,契合了藏人的生活方式和環(huán)境,,一經推出,也立即和當地進行了深入的契合,。 共謀的產物和未來產生新共謀的溫床,,其典范,非互聯網莫屬,,非一些良性的高福利的生態(tài)鏈莫屬,,一旦形成這樣一些東西,,就立即可以產生非常高維度的共謀。曾經的波音公司的鬼怪實驗室就是如此,,鬼怪實驗室聚集了社會上最牛的創(chuàng)新者,,而這些創(chuàng)新者又在鬼怪實驗室里得到足夠大的認同,把全美國的最牛的科技朋克,,通過鬼怪實驗室,,以及若干未來課題聚合在一起,反過來又推進了鬼怪實驗室的前瞻性,。這是前所未有的偉大創(chuàng)新,。
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生物安全檢測控制在餐飲中的重要作用
生物技術 2013-10-10 10:45
 餐飲業(yè)在人們的生活中一直扮演著重要的角色。由于餐飲行業(yè)經營品種豐富,,數量繁多,,烹調方式、烹飪方法多變,,日常使用的食品(原料)供貨渠道復雜,,且加工過程又多以傳統(tǒng)工藝手工操作為主,點多,、面廣,,隨意性大,因此增加了供餐食品在加工過程中生物危害發(fā)生的幾率,。   一般說來,,每一類食品都具有一些特定的微生物和某些相關的致病菌,因此,,餐飲行業(yè)的工作人員應充分了解相關的微生物,、致病菌的種類及其危害程度,這也是食品安全管理體系建立的核心內容之一,。   比如,,預防沙門氏菌危害的措施包括:烹調過程中,加熱時間要充分;將要貯存的食品于4℃或4℃以下溫度冷藏,,防止沙門氏菌生長;盡量縮短儲存時間,,防止烹調或煮制后交叉污染;禁止病人和沙門氏菌攜帶者進入操作區(qū);徹底加熱,在70℃條件下,,5分鐘內可殺死全部沙門氏菌,。在燉煮肉、禽類食品時,,要盡量將塊切得小些,,食物要充分煮熟、煮透;吃燒烤食品時要把肉徹底烤熟,。   大腸桿菌是一種在人和溫血動物腸道內常見的細菌,,主要通過食用被污染的食物傳染給人類,。但大多數大腸桿菌菌株無害。所以食用食品前應充分加熱殺菌;控制環(huán)境衛(wèi)生并在在4°C以下冷藏產品;防止烹調過程中發(fā)生交叉污染;禁止有病人員加工食品,。   食品中存在的單核細胞增生李斯特氏菌對人類的安全具有危險,。餐飲業(yè)中帶菌較高的食品有:牛奶和乳制品、肉類(特別是牛肉),、蔬菜,、沙拉、海產品,、冰淇凌等,。   單增李斯特氏菌在一般熱加工處理中能存活,所以在食品加工中,,中心溫度必須達到70℃持續(xù)兩分鐘以上;單增李斯特氏菌在自然界中廣泛存在,,即便產品已經過熱加工處理充分滅活了單增李斯特氏菌,仍有可能造成產品的二次污染,,因此蒸煮后防止二次污染是極為重要的控制手段;由于單增李斯特氏菌在4℃下仍然能生長繁殖,未加熱的冰箱食品增加了食物中毒的危險,,因而冰箱食品需加熱后再食用,。   餐飲企業(yè)實施并建立食品安全管理體系,科學地對生物危害進行控制,,一定程度上能夠有效地保證食品的衛(wèi)生安全性,,有益于保障廣大消費者權益及身體健康,更新餐飲行業(yè)整體衛(wèi)生觀念,、注重質量控制意識和質量管理水平,。
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化妝品生產過程中微生物的預防控制
生物技術 2013-10-9 13:33
  一 化妝品微生物污染狀況   隨著人們生活水平的提高以及對健康和美的追求,化妝品日益普及,,已成為生活必需品,。安全性、實用性,、功效性和穩(wěn)定性是化妝品必須具備的條件,,其中,微生物安全是化妝品衛(wèi)生安全的一個重要組成部分,。   為了保障化妝品的微生物安全,,我國從1987年開始,先后制訂并頒布了《化妝品衛(wèi)生標準》(GB7916-87),、《化妝品微生物標準檢驗方法》(GB7918.1-7918.5-87),、《化妝品生產企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》(2001年)、《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(1999年發(fā)布,,2002年修訂)等相關標準和規(guī)范,,對化妝品定出了菌落總數,、糞大腸菌群、綠膿桿菌,、金黃色葡萄球菌,、霉菌與酵母五項微生物指標和相應的檢驗方法,規(guī)定眼部化妝品,、口唇等粘膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品菌落總數不得大于500CFU/mL或500CFU/g,,其它化妝品菌落總數不得大于1000CFU/mL或1000CFU/g,每克或每毫升產品中不得檢出糞大腸菌群,、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌,,化妝品中霉菌和酵母菌總數不得大于100CFU/mL或100CFU/g。   自標準頒布以來,,各省市衛(wèi)生監(jiān)督機構歷年來的監(jiān)測結果顯示,,微生物指標存在著一定比例的超標是普遍的問題,主要是菌落總數超標,,其次是糞大腸桿菌,、霉菌與酵母,較少有國家監(jiān)控的致病菌檢出,。廣東省微生物分析檢測中心對2002~2003年部分化妝品企業(yè)送檢產品的分析結果顯示,,166份樣品的細菌學指標總超標率為6.0%,霉菌與酵母指標總超標率為7.2%,,經初步分離鑒定,,細菌主要有芽孢桿菌屬,占細菌總數的28.6%,,假單胞菌屬,,占24.1%,葡萄球菌屬,,占18.5%,,其它菌屬占28.8%,包括沙雷氏菌屬,、產堿菌屬,、微球菌屬、氣單胞菌屬,、腸桿菌屬,、克雷伯氏菌屬、愛文菌屬等,,霉菌與酵母主要有木霉屬,、曲霉屬、根霉屬,、脈孢菌屬,、短梗霉屬,、假絲酵母屬等。   二 微生物污染的來源及預防與控制   化妝品成份復雜,,含有的許多營養(yǎng)物質是污染微生物生長的良好培養(yǎng)基,,在化妝品的整個生產過程中,從原料進廠,,經過多道工序制成產品,,各種各樣的因素均有可能導致微生物的污染。分析化妝品生產過程中微生物污染的來源,,采取相應的預防和控制措施,,對于保證產品質量是非常必要的。   (一)原料   化妝品是由各種原料經過合理調配加工而成的復配混合物,,原料種類繁多,,性能各異,有油質原料,、粉質原料,、膠質原料、表面活性劑,、溶劑原料,、香精香料、染料,、顏料等,,在這些原材料中,,天然的動植物成份及其提取物如明膠和骨膠原多肽水解物,、胎盤提取液、水貂油,、羊毛脂,、人參、當歸,、蘆薈及其提取液等,,極易受到微生物的污染,其次被微生物污染可能性大的原料還有增稠劑,、粉體,、表面活性劑稀溶液等,相對而言,,油脂,、高級脂肪酸、醇類,、香料,、酸,、堿等原料被微生物污染的可能性較小。   生產流程中有加熱工序的產品,,如加熱至85~90℃,,保持20~30min,可殺滅絕大部分細菌(芽孢菌屬除外),,對于在加工過程不能加熱的原料,,如已確知其含菌量較大,可采用適當的方法(如氣體滅菌,、輻照滅菌或過濾除菌)事先處理,。已檢驗合格的原料在貯存時應遵循以下要求:所有原料離地存放;原料倉庫經常清潔和消毒;倉庫盡可能保持恒定的溫度與濕度;液體原料的貯罐要有蓋;各批原料按日期順序使用,減少貯存時間;當原料貯存期較長時,,應先檢驗微生物指標后再使用,。   (二)水   水在整個化妝品生產過程中所占的地位極其重要,一般化妝品配方中水的比例大約為30%~70%,,工藝生產中水的用量更大,。普通的生活飲用水中含有一定量的Ca2+、Mg2+,、Fe3+,、Mn2+、Na+等離子以及有機物和微生物,,不宜用于制造化妝品,。隨著科學技術的飛躍發(fā)展,各種水質純化技術推陳出新,,微濾(MF),、超濾(UF)、納濾(NF),、離子交換,、反滲透(RO)、電滲析(ED)等技術的單獨或組合應用,,可以得到符合化妝品配制及生產用水要求的純水或超純水,。   必須指出,經過離子交換或反滲透等方法處理的純水或超純水中,,仍有一定數量的微生物存在,,必須對其進行消毒殺菌處理,常用的方法有紫外線消毒,、臭氧殺菌,、煮沸滅菌、化學消毒劑消毒等。   (三)管道與設備   化妝品生產設備包括乳化罐,、貯罐,、管道、閥門,、接頭,、流量計、過濾器,、泵和灌裝機等,,大多數化妝品生產企業(yè)產品種類繁多,設備為多種產品共用,,如果采用通用的化工生產設備,,在設計時沒有從清潔衛(wèi)生方面考慮,拆卸較麻煩,,難以完全清洗消毒,,設備和管道上滋生了微生物,產品流經時會不斷被污染,。   要殺滅生產設備及管道中的微生物,,首先必須將設備和管道清洗干凈,徹底去除粘附的污垢,,以免污垢成為微生物的保護傘,,影響消毒滅菌的效果。針對不同類型的設備,,可分別采用浸泡,、噴霧、局部清洗,、高壓沖洗和內部循環(huán)清洗等一種或幾種清洗方法,,對于設備和管線上較難清除的沉積物和粘附污物,則需要浸泡,、溶解,、加熱并結合機械作用才能去除,,特別是處于死角的殘渣,,需要拆卸后才可清除干凈,而這些殘渣正是滋生微生物的重要來源,,容易積存殘渣的地方包括閥門,、出口和入口、過濾器,、灌裝機的活塞和泵等,。   設備和管道清洗后必須進行消毒,常用的消毒方法有蒸汽消毒和化學消毒。采用蒸汽消毒時,,被消毒的設備必須是耐熱的,,消毒的效果與接觸時間有關,敞口容器消毒一般需要30min,,如果是耐壓容器,,使用高壓消毒,接觸時間可適當縮短至5~15min,。蒸汽消毒的優(yōu)點是效果好,,消毒后不需沖洗,缺點是能源消耗較大,,要有鍋爐,。同一類型的消毒方法還有熱水消毒,用90℃的熱水進行循環(huán),,對管路消毒較合適,。化學消毒是利用各種化學消毒劑進行消毒,,是一種冷消毒,,不需加熱。常用于化妝品管道與設備的化學消毒劑有乙醇,、二氧化氯,、過氧乙酸、次氯酸鈉等,,采用化學消毒劑對設備和管道進行消毒,,必須充分了解設備的材質和消毒劑的性能,按照合適的消毒劑濃度和作用時間,,保證消毒效果,。為了避免長期使用單一的消毒劑造成微生物對消毒劑產生抗藥性,設備消毒最好有較長遠的計劃,,輪流使用不同種類的消毒劑,。   (四)包裝物   化妝品的內容物因容器和附件而污染微生物的情況是屢見不鮮的,容器生產廠家的衛(wèi)生環(huán)境未必能保證容器在生產,、貯存和運輸過程中的清潔衛(wèi)生,,故包裝容器在使用前應按以下程序進行清潔和消毒處理:①用清水沖洗一遍;②消毒劑浸泡10~30min;③用去離子水清洗一遍;④將洗好的包裝容器口朝下放在筐里,運到烘干室烘干;⑤將烘干后的包裝容器運到無菌室,,口朝上,,用紫外燈照射30min備用。   (五)生產環(huán)境   未經潔凈處理的空氣中含有各種各樣的微生物,,可在化妝品的制造,、靜置,、灌裝、包裝等環(huán)節(jié)對產品造成污染,。   化妝品廠房設計沒有專門的規(guī)范,,可參考已有的潔凈廠房設計規(guī)范(GB50073-2001),達到《化妝品生產企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》的要求:生產車間空氣中細菌總數不得超過1000個/立方米,,同時,,半成品儲存間、灌裝間,、清潔容器儲存間,、更衣室及其緩沖區(qū)必須有空氣凈化或者空氣消毒設施。建議在生產車間安裝含高,、中,、低效過濾網的空氣過濾系統(tǒng),使進入車間的空氣達到潔凈的要求;還應在車間安裝紫外線燈,,每天開始生產前照射30min;或者采用臭氧發(fā)生器發(fā)生的臭氧對生產車間的空氣進行消毒;如能定期輔以藥物(二氧化氯,、過氧乙酸等)熏蒸或噴霧,可以保證較高的空氣潔凈度,,大大減少產品被空氣中的微生物沾污的危險,。   (六)操作人員   正常人的皮膚、手,、毛發(fā),、衣服、鞋等均帶有大量的微生物,,參與生產的操作人員是化妝品生產中不容忽視的污染源,,為了預防這類污染,應注意如下幾項:①進入生產車間之前穿戴潔凈的工作服,、工作帽,、工作鞋、口罩,、手套等;②每次進入有潔凈要求的區(qū)域開始工作時,,都應徹底消毒洗手;③每次完成不衛(wèi)生的動作或工作后,應徹底消毒洗手;④患有皮膚病,、化膿性疾病,、手指創(chuàng)傷或傷風感冒的人員應暫時調離與內容物直接有關的工作崗位。   總之,,微生物的預防和控制是一項系統(tǒng)工程,,由于微生物無處不在,,在化妝品的生產過程中,,任何一個環(huán)節(jié)的疏忽,都有可能導致企業(yè)在其它方面的投資與努力白費,只有全面提高質量意識,,從原料,、設備、工藝,、包裝,、環(huán)境、人員等各方面嚴格控制,,同時做好各環(huán)節(jié)微生物的監(jiān)測,,才能充分保障化妝品的微生物安全。
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什么樣的培養(yǎng)基是最好的培養(yǎng)基
生物技術 2013-10-8 17:15
  培養(yǎng)基的質量好壞在微生物檢驗過程中起到至關重要的作用,,所以說做好生物檢驗工作的關鍵在于提高培養(yǎng)基的質量,。通常有專門的人員負責培養(yǎng)基的質量檢驗工作。   如今,,由于我國的培養(yǎng)基行業(yè)發(fā)展突飛猛進,,很多的生物實驗室為了方便和避免購買原材料的麻煩,都漸漸的使用商品培養(yǎng)基,,而且也十分穩(wěn)定,,主要按照說明來配置和存貯,通常都會得到滿意的實驗效果,,但不是所有的都是如此,,所以,不管培養(yǎng)基時購買的還是自制的,,都要做好質量檢驗工作,,一般從以下三方面入手:   1.直觀性狀的檢查   a.色澤。培養(yǎng)基的顏色通常不會太深,,以避免影響微生物的正常生長和繁殖,,并且也不便于觀察實驗結果。如果培養(yǎng)基含有指示劑,,則還要檢查其顏色是否正常,。   b.澄明度,液體培養(yǎng)基要確保無沉淀,,一定要澄清,,如果是固體培養(yǎng)基,應該保證沒有絮狀物或者沉淀,。   c.PH值,,每種微生物對培養(yǎng)基的PH值要求不同,只有在適宜的PH環(huán)境中微生物才能更好的生長繁殖,。檢查培養(yǎng)基的PH值是否在正常的范圍內,。   d.硬度,,對于固體培養(yǎng)基要檢查其軟硬度是否合適,包括半固體和半流體,。   2.無菌檢查   任何培養(yǎng)基都要進行無菌檢查,,檢測合格后才能使用。   3.性能檢查   采用穩(wěn)定的標準菌株進行賠案g級的性能試驗,,包括微生物繁殖,,分離和鑒別等,合格后才可以使用,。
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為什么V-P實驗結果會出現誤判
生物技術 2013-9-30 11:03
目前,,V-P培養(yǎng)基提供的對實驗結果判定說明是接種細菌于37℃培養(yǎng)24h,滴加V-P甲,、乙液后在30min內觀察結果,,變紅色為實驗陽性,不變色為陰性,。然而在實際工作中,,此方法會造成一些實驗結果的誤判,并不是所有的細菌都適用上述判定方法,。   V-P實驗常用于細菌檢測,,可檢驗細菌利用葡萄糖產生中性乙酰甲基甲醇的能力,在堿性環(huán)境下,,乙酰甲基甲醇被空氣中氧氣氧化成二乙酰,,二乙酰與培養(yǎng)基內蛋白胨中精氨酸所含有的胍基反應可生成紅色化合物。   蠟樣菌V-P培養(yǎng)基培養(yǎng)24h,,滴加甲,、乙液后30min內呈現陽性,證明試驗用V-P培養(yǎng)基無質量問題,。單增菌V-P培養(yǎng)基分別于30℃和37℃培養(yǎng)24h,、48h、72h,、96h,,實驗結果如下表。通過實驗我們發(fā)現兩種現象,。其一,,單增菌培養(yǎng)的時間短,出現陽性結果慢,,隨著培養(yǎng)時間延長,,陽性結果出現的時間縮短。其二,,48h內,,單增菌于30℃培養(yǎng)要比在37℃培養(yǎng)陽性結果出現的快些,。   究其實驗原理,V-P實驗顯色不同于糖醇類培養(yǎng)基顏色變化,,因其中所含指示劑變化特別靈敏,。該實驗最終出現紅色物質與二乙酰的含量有直接關系,,二乙酰含量大,,它與胍基生成的紅色物質就多,觀察到培養(yǎng)基顯紅色的速度就快,,二乙酰含量少則反之,。試驗中,隨著培養(yǎng)時間的延長,,單增菌利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量越來越多,,乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰的含量也就越來越多,從而陽性結果顯現的時間隨之縮短,。相對于37℃,,單增菌于30℃培養(yǎng)更適宜生長,并且在相同的培養(yǎng)時間內,,其利用葡萄糖生成的乙酰甲基甲醇含量更多些,,尤其48h內表現得更為突出。   從大量的實際工作中發(fā)現,,有些細菌的生化實驗不應完全按照試劑盒說明書的方法去做,,應參考其生物學特點,在必要時做出適當的調整,,才能得到更加可信,、滿意的實驗結果。正如上述實驗,,若按試劑盒提供的結果判定說明,,培養(yǎng)72h內的陽性結果均超過30min,理應判定為陰性,,而單增菌更適宜于30℃生長,,且生長緩慢,從而V-P實驗需要適當的延長培養(yǎng)時間,,4h內觀察結果為宜,,所以不能輕易地判定為陰性。
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菌種保藏方法介紹
生物技術 2013-9-27 09:39
用低溫,、干燥和隔絕空氣等方法可以使微生物代謝能力降低,。因此,采用適宜的方法對菌種進行保藏,,可以確保菌種在一定時間內存貨并不被污染,、不產生變異,,是菌種保持原有的活性以及生理生化遺傳特性。   普通菌種保藏方法   (1)傳代培養(yǎng)保藏法:將菌種接種到適宜的培養(yǎng)基上,,培養(yǎng)后,,放置于4℃冰箱中保存,并隔一段時間進行傳代,。根據菌種生長不同要求,,可分為斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)和液體培養(yǎng),。   (2)液體石蠟保藏法:在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,,一方面可以防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可以阻止氧氣進入,,從而適當延長保藏時間,。但此方法對于某些可以同化烴類的微生物則不宜使用。   (3)真空冷凍干燥法:將菌種在極低溫度(-70℃)下快速冷凍,,然后利用減壓使其中水分升華,,達到干燥的目的。微生物培養(yǎng)物經過該方法處理后處于一種低溫,、干燥,、缺氧的條件下,因而代謝處于相對靜止狀態(tài),,可以保存較長時間,。除不產生孢子只產生菌絲體的絲狀真菌不宜采用該方法外,其他如病毒,、細菌,、放線菌、酵母菌,、絲狀真菌等都可以采用該方法,,且效果較好。一般真空冷凍干燥需加入保護劑,,如牛乳,、血清、糖類,、甘油,、山梨醇、氨基酸類,、明膠,、蛋白胨等一種或多種物質。   (4)沙土管保藏法:將斜面上的新鮮培養(yǎng)物制成菌懸液或孢子懸液,然后將懸液無菌注入已滅好菌的砂土管中,,使細胞或孢子吸附在砂子載體上,,置于干燥器中干燥后加以保存。此方法多用于能產生孢子的微生物如霉菌,、放線菌的保藏,,可保存2年左右。   (5)液氮保存:將保存的菌種用保護劑制成菌懸液密封安瓿瓶內,,迅速冷凍后,,貯藏于-150~-196℃的液氮超低溫冰箱中。該方法有些菌種可保存長達9年以上,。此方法除適于一般微生物的保藏外,,對于一些用冷凍干燥法都難以保存的微生物如支原體,、衣原體,、氫細菌、難以形成孢子的霉菌,、噬菌體及動物細胞均可長期保藏,,而性狀不變異。
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產氣莢膜梭菌 你知道多少
生物技術 2013-9-26 10:31
  生物學特征   產氣莢膜梭菌是人類氣性壞疽的主要病原菌,。1892年,美國病理學家W.H.韋爾奇等自一尸體分出本菌,因而又稱韋氏梭菌,。菌體較大,大小為(0.9~1.3)×(3.0~9.0)微米,無鞭毛,,有莢膜,。芽孢橢圓形,位于偏端。專性厭氧,。菌落直徑2~5毫米,,血瓊脂平板上有溶血圈。糖發(fā)酵能力強,,產酸產氣,。本菌的特征之一是在牛乳培養(yǎng)基中呈暴烈發(fā)酵現象。DNA中的G+C克分子含量為24~27%,。本菌廣泛存在于土壤,、人和動物的腸道以及動物和人類的糞便中,會散發(fā)臭味,,常因深部創(chuàng)傷而感染,。   形態(tài)與染色   為革蘭陽菌粗短大桿菌,大小(1~1.5)μm×(3~5)μm,。兩端鈍圓,,單個或成雙排列,偶見鏈狀,。芽胞橢圓形,,位于菌體中央或次極端,,芽胞直徑不大于菌體,在一般培養(yǎng)時不易形成芽胞,,在無糖培養(yǎng)基中有利于形成芽胞,。在機體內可產生明顯的莢膜,無鞭毛,,不能運動,。    培養(yǎng)特征   本菌雖屬厭氧性細菌,但對厭氧程度的要求并不太嚴,,甚至在EH=200-250mv的環(huán)境內也能生長,。   在普通培養(yǎng)基上能生長,若加葡萄糖,,血液,,則生長更好。生長適宜溫度為37-47℃,,多認為43-47℃為最宜本菌生長和繁殖速度極快,,在適宜條件下增代時間僅8min,可利用高溫快速培養(yǎng)法,,對本菌進行選擇分離,,如在45℃下,每培養(yǎng)3-4小時傳種1次,,即可較易獲得純培養(yǎng),,在深層葡萄糖瓊脂中大量產氣,致使瓊脂破碎,。   在庖肉培養(yǎng)基中培養(yǎng)數小時即可見到生長,,產生大量氣體,肉渣或肉塊變?yōu)槁詭Х凵�,,但不被消化�?   在普通瓊脂平板上培養(yǎng)15小時左右可見到菌落,,培養(yǎng)24小時菌落直徑2~4mm,圓形,、凸起,、光滑、半透明,、邊緣整齊,、無遷徙生長現象。   在血平板上,,多數菌株有雙層溶血環(huán),,內環(huán)完全溶血,是由于θ毒素的作用;外環(huán)不完全溶血則是由α毒素所致。   在牛奶培養(yǎng)基中能分解乳糖產酸,,是酪蛋白凝固,,同時產生大量氣體,將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀,,并將液面上的凡士林層向上推擠,,甚至沖開管口棉塞,氣勢兇猛,,稱為“洶涌發(fā)酵”(stormy fermentation),,是此菌的特征。    生化特性   所有型菌株均能發(fā)酵葡萄糖,、麥芽糖,、乳糖和蔗糖,產酸產氣,。不發(fā)酵甘露醇或水楊苷;液化明膠,,產生H2S,不能消化已凝固的蛋白質和血清,,吲哚陰性,。主要代謝產物為乙酸和丁酸,,有時也形成丁醇,。    分型   根據本菌產生外毒素種類之不同,可將產氣夾膜梭菌分成A,、B,、C、D,、E5個毒素型,。5型中對人治病的主要是A型和C型,A型最常見,,引起氣性壞疽和胃腸炎型食物中毒;C型能引起壞死性腸炎,。    致病條件   致病條件與全國各地破傷風梭菌相似。產氣莢膜梭菌既能產生強烈的外毒素,,又有多種侵襲性酶,,并有莢膜,構成其強大的侵襲力,,引起感染致病,。毒素的毒性雖不如肉毒毒素和破傷風毒素強,但種類多,,外毒素有α,、β、γ、δ,、ε,、η、θ,、ι,、κ、λ,、μ,、ν等12種,和具有毒性作用的多種酶,,如卵磷脂酶,、纖維蛋白酶、透明質酸酶,、膠原酶和DNA酶等,,構成強大的侵襲力。根據細菌產生外毒素的種類差別,,可將產氣莢膜梭菌分成a,、b、c,、d,、e 5個型。對人致病的主要是a型,,引起氣性壞疽和食物中毒,。c型則引起壞死性腸炎。在各種毒素和酶中,,以α毒素最為重要,,α毒素是一種卵磷脂酶,能分解卵磷脂,,人和動物的細胞膜是磷脂和蛋白質的復合物,,可被卵磷脂酶所破壞,故α毒素能損傷多種細胞的細胞膜,,引起溶血,、組織壞死,血管內皮細胞損傷,,使血管通透性增高,,造成水腫。此外,,θ毒素有溶血和破壞白血球的作用,,膠原酶能分解肌肉和皮下的膠原組織,,使組織崩解,透明質酸酶能分解細胞間質透明質酸,,有利于病變擴散,。本菌能引起人類多種疾病,其中最重要的是氣性壞疽,。
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生化試驗可疑菌純化的目的
生物技術 2013-9-23 10:26
  致病菌檢測過程中,,生化試驗或者初步篩選以后確證性試驗以前,一般要求將可疑菌菌落純化與特定營養(yǎng)型平板上,,比如單增李斯特檢驗使用TSA-YE進行可疑菌純化,,沙門氏菌和志賀氏菌檢測使用營養(yǎng)瓊脂進行純化�,?梢删兓哪坑腥缦聨c:   一:根據純化以后的平板上生長的菌落大小及形態(tài),,可以判斷挑取的可疑菌是不是單獨的純菌落,有沒有發(fā)生菌落疊加現象,。   二:生化試驗一般項目較多,,選擇性分離平板上的可疑菌一般都帶有顏色,無法制作菌懸液,。生長較小的可疑單菌落無法滿足接菌量要求,,而且不能保證每個項目接菌量相同。實驗結果會有差異,。而純化以后的平板上的所有菌落均來源于同一個單菌落,,有大量的菌供生化試驗使用。   三:選擇性分離平板一般都成分復雜,,并且有一定抑制性,,其中可能含有某些對個別生化產生產生影響的物質。而用于純化的平板都是營養(yǎng)型的,,不會對生化項目造成影響。
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